Гравиметрические (весовые) методы определения общего белка сыворотки
Гравиметрические (весовые) методы определения общего белка в сыворотке крови основаны на определении массы белка после его выделения и сушки. Эти методы являются довольно точными и могут быть использованы в лабораторной практике. Основные этапы такого анализа включают:
1. **Подготовка образца**: Сначала сыворотка крови отделяется от клеток с помощью центрифугирования. Образец очищается от нежелательных примесей.
2. **Препятствование помех**: В некоторых случаях может потребоваться предварительное осаждение белков с использованием различных реагентов или условий (например, с помощью кислотного осаждения, как в случае с трихлороцетатным кислым осаждением).
3. **Осаждение белка**: Обычно в качестве осаждающего агента используют, например, сульфат аммония. В течение процесса осаждения белок трансформируется в нерастворимую форму.
4. **Центрифугирование**: Осажденный белок отделяется от супернатанта с помощью центрифугирования.
5. **Сушка**: Осажденный белок высушивается до постоянной массы при определенной температуре, что позволяет получить конечную массу белка.
6. **Взвешивание**: Полученную массу белка взвешивают на высокоточных весах.
7. **Выражение результатов**: Результаты выражаются в граммах на миллилитр или в процентах относительно массы образца.
Гравиметрические методы, хотя и трудоемкие и требующие значительного времени, обеспечивают высокую точность и воспроизводимость результатов. В последние годы они всё чаще заменяются более быстрыми и менее трудоемкими методами, такими как спектрофотометрия или иммуноанализ, однако гравиметрические методы всё ещё находятся в использовании в научных исследованиях и некоторых клинических лабораториях.