Азотометрические методы определения общего белка сыворотки

Азотометрические методы являются одним из способов определения общего белка сыворотки крови. Эти методы основаны на измерении общего содержания азота, который содержится в аминокислотах, составляющих белки. Одним из наиболее распространенных методов является метод Кьельдаля, который включает в себя несколько этапов: 1. **Превращение белка в аммиак**: Сначала образцы сыворотки подвергаются кислотному расщеплению с использованием серной кислоты. В этом процессе белки денатурируются и разлагаются на аминокислоты, которые затем окисляются до образования аммиака. 2. **Нейтрализация**: Полученный аммиак нейтрализуется с помощью щелочи, например, натрий гидроксида. 3. **Детекция**: Аммиак, который образуется в процессе, может быть измерен различными способами, например, с использованием цветометрических реакций. Один из распространенных способов – это использование соединений, таких как фенолфталеин, которые изменяют цвет в зависимости от концентрации аммиака. 4. **Расчет содержания белка**: На основании концентрации азота и известного коэффициента преобразования (обозначающего отношение между содержанием азота и белка) можно рассчитать общее содержание белка в образце. Кроме этого, существует несколько других азотометрических методов, таких как: - **Метод Дюма**: В отличие от метода Кьельдаля, здесь белки сжигаются с образованием газообразного азота, который затем измеряется. - **Методы на основе биуретовой реакции**: Хотя этот метод более специфичен для белков, он также может использоваться для определения общего содержания белка с использованием попеременного измерения азота. Каждый из этих методов имеет свои преимущества и недостатки, а выбранный метод зависит от доступного оборудования, необходимой точности и специфических целей исследования.